<option id="a0nji"><li id="a0nji"><track id="a0nji"></track></li></option>
  • <sub id="a0nji"></sub>
  • <nav id="a0nji"><xmp id="a0nji"><tbody id="a0nji"><center id="a0nji"></center></tbody><tbody id="a0nji"><center id="a0nji"></center></tbody>
  • <tbody id="a0nji"><noframes id="a0nji"><tbody id="a0nji"></tbody>
    <track id="a0nji"><noframes id="a0nji">
  • <sub id="a0nji"></sub>
    <track id="a0nji"><li id="a0nji"></li></track>
    技術服務

    細胞培養的成功因素之一細胞消化


    1. 絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。


    2.細胞如何
    算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。


    3.EDTA的作用。胰酶切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA。

    4.PBS
    洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為血清中含有抑制胰酶的蛋白。對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制胰酶的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。

    聯系我們
    產品搜索

    細胞系,ATCC細胞,ATCC菌種,細胞系目錄,ATCC,鼠傷寒沙門氏菌,atcc細胞庫,人**瘤細胞,人食管癌細胞,ATCC 19404,ATCC 25922,ATCC 19146,微生物菌種,細胞株,標準菌株,ATCC中國,atcc上海代理,CMCC 菌株,ATCC菌株,細胞目錄,質控菌株,腫瘤細胞株,乳腺癌細胞系,人肝癌細胞系

    產品目錄

    Copyright? 2003-2022  上海復祥生物科技有限公司版權所有            電話:021-35080510
    傳真:021-35080520    地址:上海市虹口區赤峰路630號南雁大廈1901室    郵編: 滬ICP備10013034號-3  

      

    滬公網安備 31010902002429號

    国产精品一区二区av
    <option id="a0nji"><li id="a0nji"><track id="a0nji"></track></li></option>
  • <sub id="a0nji"></sub>
  • <nav id="a0nji"><xmp id="a0nji"><tbody id="a0nji"><center id="a0nji"></center></tbody><tbody id="a0nji"><center id="a0nji"></center></tbody>
  • <tbody id="a0nji"><noframes id="a0nji"><tbody id="a0nji"></tbody>
    <track id="a0nji"><noframes id="a0nji">
  • <sub id="a0nji"></sub>
    <track id="a0nji"><li id="a0nji"></li></track>